Abstract
SAMMENDRAG
Celledød deles ofte inn i nekrose og apoptose. Apoptose er en velregulert celledødsprosess
involvert i mange viktige funksjoner, blant annet utviklingen av nervesystemet. Ubalanse i
forholdet mellom apoptosestimulerende og apoptosehemmende signaler kan føre til alvorlige
sykdomstilstander som kreft, autoimmune og nevrodegenerative sykdommer.
Som respons på et apoptotisk stimulus kan caspasene, en gruppe proteaser, aktiveres i en
kaskadereaksjon. Aktiverte effektorcaspaser kløyver cellulære proteiner og er ansvarlige for
mange av de morfologiske og biokjemiske endringene som kjennetegner apoptose.
Transkripsjonsfaktoren NGFI-B kan fremme både celleoverlevelse og celledød. Ved å
translokalisere fra kjernen til mitokondriene kan NGFI-B indusere apoptose ved
caspaseaktivering. NGFI-B er et substrat for den vekstfaktoraktiverte MAP kinasen ERK2.
ERK2 kan fosforylere aminosyren thr 142 på NGFI-B, og hindre translokalisering av NGFI-B
fra kjernen til mitokondriene.
Cellelinjene PC12 og CV1 ble i denne oppgaven vurdert som potensielle modeller for å
studere NGFI-B-forflytning fra kjernen til cytosol, aktivering av caspase 3, og celledød.
Vekstfaktorene EGF og NGF førte til en reduksjon i kjernelokaliseringen av NGFI-B.
Samtidig serumdeprivasjon (celledødssignal) førte til en reversering av denne effekten.
Serumdeprivasjon, men ikke calcium ionophore, viste seg å være en sterk aktivator av caspase
3 i PC12-celler, en aktivering som ble motvirket av vekstfaktorene EGF og NGF. Den nye
caspaseaktivatoren PAC-1 aktiverte caspase 3 i noe mindre grad enn serumdeprivasjon i
PC12-celler. EGF og NGF beskyttet mot PAC-1-indusert caspase 3-aktivering, et
overraskende funn som kan indikere en mulig ”crosstalk” tilbake til andre apoptoseveier.
Både serumdeprivasjon og PAC-1 førte til økt celledød i PC12-celler. Vekstfaktoren NGF
hadde en tendens til beskyttelse mot begge behandlingene.
Det kan konkluderes med at serumdeprivasjon og calsium ionophore induserte celledødsveier
som ikke syntes å involvere NGFI-B-forflytning til mitokondriene.
PC12 derimot, var godt egnet for studier av caspase 3-aktivering og celledød, mens CV1 ikke
egnet seg som modell for disse studiene, med de valgte metodene. CV1 kan likevel være en
robust celletype hvor det vil være mulig å studere proteiner involvert i apoptose uten at
cellene dør. PAC-1 er et interessant molekyl som kan brukes til å studere caspase 3-funksjon.