Abstract
Når vi bruker stråling til å behandle kreftceller gir det oss et vindu med mulighet hvor cellen trenger å reparere skaden, hvis skaden ikke blir reparert kan det føre til celledød. For å øke effektiviteten til stråle terapi kan vi derfor prøve å øke vår forståelse for en av de viktigste reparasjons mekanismene til DNA dobbelttrådbrudd - Ikke-homolog rekombinasjon (NHEJ). Vår hypotese er at fosforylering av RNA polymerase II C-terminal domene (RNAPII CTD) spiller en viktig rolle i DNA-reparasjon etter ioniserende stråling (IR) ved å rekruttere ikke-homolog rekombinasjon reparasjonsfaktorer. For å undersøke dette brukte vi kinase hemmer THZ1 og nedregulering av PNUTS, en regulatorisk subenhet til fosfatase komplekset PNUTS-PP1 RNAPII CTD. Vi undersøkte også hvordan DDX5, et C-terminal bindende proteinet, kan være involvert i ikke-homolog rekombinasjon. Vi fant at fosforylering av det C-terminale domene er viktig for DNA-skade reparasjon etter ioniserende stråling, vist som reduksjon av DNA skade etter behandling med THZ1. Fosforylering av CTD var også viktig for rekrutering av DDX5 til kromatin. Videre fant vi at DDX5 sannsynlig vis er viktig for ikke-homolog rekombinasjon i NHEJ pEJ assayene. Men nedregulering av DDX5 reduserte ikke reparasjon av DNA skade etter IR. På den andre siden motvirket nedregulering av PNUTS reparasjonsdefektene etter IR og THZ1. Til slutt så vi at nedregulering av PNUTS motvirket en andel av celler med høyt γH2AX nivå etter THZ1, og motvirket γH2AX i S-fase celler etter THZ1.