Ekstrakter av hageblåbær, skogsblåbær, tranebær og tyttebær hemmer CYP3A4 in vitro

Abstract

Introduksjon: I de senere år har det vært et stort fokus på et sunt kosthold bestående av mye frukt og bær og de helsebringende effektene dette medfører. Det er imidlertid holdepunkter for at inntak av visse typer frukt og bær kan forårsake interaksjoner med legemidler som metaboliseres av cytokrom P450 (CYP) 3A4. Mest kjent er grapefruktjuice som inneholder furanokoumariner og som har vist å hemme CYP3A4. Hensikten med denne oppgaven var å ekstrahere hageblåbær, skogsblåbær, tranebær og tyttebær med ulike løsemidler, -for videre å undersøke om de ulike bærekstraktene påvirker CYP3A4 in vitro.

Metoder: For å isolere forskjellige typer substanser i hageblåbær, skogsblåbær, tranebær og tyttebær ble bærene ekstrahert med ulike løsemidler; diklormetan, 96%-etanol, 50%-etanol og vann. Videre ble de ulike ekstraktene undersøkt for inhibering av CYP3A4-aktivitet. Dette ble gjort ved å inkubere prøvene med mikrosomer som uttrykker CYP3A4 og midazolam som CYP3A4 modellsubstrat. LC-MS ble brukt til å analysere dannelsen av midazolams to hovedmetabolitter 1`-OH-MDZ og 4`-OH-MDZ. DPPH-scavenging ble brukt til å teste innholdet av antioksidanter i bærene. Ved hjelp av 1H NMR ble det foretatt en identifikasjon av ulike substanser i diklormetanekstraktet, 96%-etanolekstraktet og 50%-etanolekstraktet.

Resultater: Innledende screening av de ulike bærekstraktenes evne til å hemme CYP3A4 viste at diklormetanekstraktene og 50%-etanolekstraktene hemmet metabolismen i størst grad. Diklormetanekstraktene av hageblåbær, skogsblåbær, tranebær og tyttebær hadde IC50-verdier på henholdsvis 56±25 µg/ml, 72±19 µg/ml, 64±54 µg/ml og 62±10 µg/ml. IC50-verdier for 50%-etanolekstraktene av hageblåbær og skogsblåbær var 425±229 µg/ml og 367± 247 µg/ml. DPPH-scavenging aktivitet viste at 50%-etanolekstraktet av skogsblåbær hadde det høyeste innholdet av antioksidanter med en IC50-verdi for DPPH-aktivitet på 36±2 µg/ml. Videre hadde hageblåbærs 50%-etanolekstrakt en IC50-verdi på 45±2 µg/ml og tranebærs 50%-etanolekstraktet en IC50-verdi på 48±2 µg/ml med henhold til DPPH-aktivitet. Aromater og fettstoffer ble påvist i diklormetanekstraktene ved hjelp av 1H NMR. Hageblåbærs, skogsblåbærs, tranebærs og tyttebærs 50%-etanolekstrakter inneholdt proantocyanidiner.

Konklusjon: Diklormetanekstraktene og 50%-etanolekstraktene av hageblåbær, skogsblåbær, tranebær og tyttebær hemmet CYP3A4 in vitro. De ekstraktene som viste høyest DPPH-radikalscavenger aktivitet var 50%-etanolekstraktene av hageblåbær, skogsblåbær og tranebær. 1H NMR-spektroskopi viste innhold av proantocyanidiner i 50%-etanolekstraktene og disse kan ha bidratt til CYP3A4-hemming.