Hide metadata

dc.date.accessioned2013-03-12T08:52:28Z
dc.date.available2013-03-12T08:52:28Z
dc.date.issued2006en_US
dc.date.submitted2006-11-30en_US
dc.identifier.citationNguyen, Nhan Trong. Effekten av Lipopolysakkarid (LPS) på cysteinproteaser i RAW 264,7-celler og THP-1 celler. Hovedoppgave, University of Oslo, 2006en_US
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10852/12130
dc.description.abstractEkspresjon og aktivitet av legumain ble studert i RAW 264,7-celler (en makrofaglignende leukemisk cellelinje fra mus) og THP-1 celler (en human monocyttlignende akutt leukemisk cellelinje). LPS (endotoksin) er et lipopolysakkarid som er en bestanddel av de gramnegative bakterienes cellevegg. Den toksiske delen av LPS er lipid A, som kan stimulere celler i immunsystemet. For å studere hvordan RAW 264,7-celler og THP-1 celler påvirkes av LPS, er det interessant å se på innhold av proteolytiske enzymer (cysteinproteaser legumain og cathepsin B) i endosom/lysosom. Legumain og CB er vist å bidra til antigenpresentasjon av MHC klasse II-molekyler. Ved reseptorstimulering via mikroorganismer eller cytokiner, induseres makrofager til å uttrykke MHC-II slik at de blir antigenpresenterende celler (APC). RAW 264,7-celler og THP-1 celler ble inkubert med og uten LPS i 0-72 timer. Enzymaktivitet av legumain og CB ble målt i cellelysat ved hjelp av spesifikke peptidsubstrater og beregnet i forhold til total proteininnhold. Innhold og størrelse av legumain i RAW 264,7-celler og THP-1 celler ble analysert ved immunodeteksjon (Western blot) med legumainspesifikt antistoff. Ved hjelp av Real Time-PCR analyse ble legumain m-RNA undersøkt i RAW 264,7-celler og THP-1 celler, og om legumain reguleres ved stimulering med LPS. Resultatene viste at legumain og CB enzymaktivitet er mye høyere i RAW 264,7-celler enn i THP-1 celler (for ustimulerte og stimulerte celler). Funnene tyder ikke på at LPS har noe virkning på legumain og CB enzymaktivitet, da det var ingen forskjell mellom ustimulerte og stimulerte celler. Innhold og størrelse av legumain i RAW 264,7-celler viste et proteinbånd på 37 kDa. Dette båndet kan representere en aktiv form av legumain, siden vi målte en økning i spesifikk enzymaktivitet ved samme behandling og tidspunkt. Men legumain i THP-1 celler viste et protein bånd på 50 kDa. Dette båndet kan representere en inaktiv form av legumain, siden vi så ikke bånd i området 32-37 kDa, der vi forventet å finne den aktive formen av legumain. Dette stemte med aktivitetsmålinger. Det er uklart om LPS har noe effekt på legumain m-RNA, og om man kan forvente at ekspresjon av legumain i kontroll av antigen prosessering vil bli redusert i en tilstand av endotoksintoleranse i monocytter.nor
dc.language.isonoben_US
dc.subjectlegumainen_US
dc.titleEffekten av Lipopolysakkarid (LPS) på cysteinproteaser i RAW 264,7-celler og THP-1 celleren_US
dc.typeMaster thesisen_US
dc.date.updated2008-03-11en_US
dc.creator.authorNguyen, Nhan Trongen_US
dc.subject.nsiVDP::568en_US
dc.identifier.bibliographiccitationinfo:ofi/fmt:kev:mtx:ctx&ctx_ver=Z39.88-2004&rft_val_fmt=info:ofi/fmt:kev:mtx:dissertation&rft.au=Nguyen, Nhan Trong&rft.title=Effekten av Lipopolysakkarid (LPS) på cysteinproteaser i RAW 264,7-celler og THP-1 celler&rft.inst=University of Oslo&rft.date=2006&rft.degree=Hovedoppgaveen_US
dc.identifier.urnURN:NBN:no-17226en_US
dc.type.documentHovedoppgaveen_US
dc.identifier.duo49769en_US
dc.contributor.supervisorProfessor Harald T. Johansen og professor Rigmor Solbergen_US
dc.identifier.bibsys061889172en_US


Files in this item

FilesSizeFormatView

No file.

Appears in the following Collection

Hide metadata