• English
    • Norsk
  • English 
    • English
    • Norsk
  • Administration
View Item 
  •   Home
  • Det matematisk-naturvitenskapelige fakultet
  • Farmasøytisk institutt
  • Farmasøytisk institutt
  • View Item
  •   Home
  • Det matematisk-naturvitenskapelige fakultet
  • Farmasøytisk institutt
  • Farmasøytisk institutt
  • View Item
JavaScript is disabled for your browser. Some features of this site may not work without it.

Selektiv væskefasemikroekstraksjon av neurotensin og metabolittene i vann og biologiske væsker

Loftheim, Håvard
Master thesis
View/Open
Hovedfaghaavard.pdf (693.0Kb)
Year
2004
Permanent link
http://urn.nb.no/URN:NBN:no-11399

Metadata
Show metadata
Appears in the following Collection
  • Farmasøytisk institutt [1342]
Abstract
Neurotensin (NT), NT 1-6 og NT 1-8 ble brukt som modellpeptider for å undersøke hvilke egenskaper peptider har i væskefasemikroekstraksjon (LPME). Til analyse av ekstraktene har det blitt utviklet en HPLC-metode. Kolonnen som ble brukt var ChromSep HPLC 50×2 mm Inertsil® ODS. For å separere peptidene ble gradienteluering brukt med mobilfaser sammensatt av acetonitril (ACN), maursyre, 1-heptansulfonsyre og vann.

Peptidene ble ved hjelp av LPME ekstrahert fra vandige prøver gjennom en porøs hulfiber impregnert med organisk løsningsmiddel og inn i en 20 μl sur vandig akseptorfase i fiberens hulrom. Volumet av donorfasen ble variert mellom 0,2 ml og 1,5 ml. Ulike organiske faser ble utprøvd, men 1-oktanol viste seg best egnet. pH-verdien i donorfasen ble variert mellom 1,2 og 7,8 ved hjelp av HCl-løsninger og buffere. Donorfaser med pH 2 og 3 fungerte best avhengig av hvilken akseptorfase som ble brukt. Sulfonsyrer ble brukt som ionpardanner i donorfasen. Flere kjedelengder fra C6 til C9 til ble prøvd og 1-oktansulfonsyre gav best ekstraksjonsutbytte for alle peptidene. Surheten av akseptorfasen ble variert mellom pH 0 og 4,06. Akseptorfase med pH 0,77 gav best ekstraksjonsutbytte og en forskjell i protonkonsentrasjon mellom akseptor- og donorfase var essensielt for en vellykket ekstraksjon. Tilsetning av positive ioner til akseptorfasen i et system uten forskjell i H+-konsentrasjon gav også økte ekstraksjonsutbytter. Ekstraksjonsutbytte på 57 % ble oppnådd for neurotensin og 8 % for NT 1-8. God selektivitet ble oppnådd ved å variere pH i donorfasen. NT 1-6 ble ikke ekstrahert i særlig grad da den var for hydrofil.

Ekstraksjoner av peptider i urin ble forsøkt. Urin ble fortynnet med donorfase før ekstraksjon på grunn av saltinnholdet. NT 1-8 ble ekstrahert fra urin med ekstraksjonsutbytter mellom 8 % og 12 %. Ekstraksjonsutbytter av neurotensin og NT 1-6 ble ikke oppnådd fra urin.

For å oppnå lavere deteksjonsgrenser ble det utviklet en LC-MS-metode. Nedre deteksjonsgrense (S/N=3) ble beregnet til 1,2 ng/ml for neurotensin, 0,5 ng/ml og 1,0 ng/ml for henholdsvis NT 1-8 og NT 1-6. Akseptorfaser fra ekstraksjon av urin og vann ble analysert med LC-MS og viste ekstraksjonsutbytter i samme størrelseforhold som ved HPLC-analyse.
 
Responsible for this website 
University of Oslo Library


Contact Us 
duo-hjelp@ub.uio.no


Privacy policy
 

 

For students / employeesSubmit master thesisAccess to restricted material

Browse

All of DUOCommunities & CollectionsBy Issue DateAuthorsTitlesThis CollectionBy Issue DateAuthorsTitles

For library staff

Login
RSS Feeds
 
Responsible for this website 
University of Oslo Library


Contact Us 
duo-hjelp@ub.uio.no


Privacy policy