Undersøkelse av hNCU som koaktivator for hER<alfa>

Abstract

Sammendrag

hNCU-G1 ble først identifisert som et protein som interagerte med FP1 i hCRBP-promoteren. Videre studier viste at hNCU-G1 var i stand til å fungere som transkripsjonsfaktor fra denne promoteren. Strukturelle analyser av proteinet lokaliserte fire LXXLL motiver, som er konserverte domener hos SRC1-familien av koaktivatorer. Basert på GST-pulldownstudier, som antydet at det fantes en interaksjon med hERα-LBD, ble denne mulige funksjonelle interaksjonen undersøkt nærmere. Reportergenanalyser etter transiente transfeksjoner i SL-2-celler (Schneider Drosophila cellelinje 2), viste at tilsetting av hNCU-G1ekspresjonsplasmid i nærvær av hERα og ligand ikke øker ekspresjonen av reportergenet. Derimot ble det vist at hNCU-G1 alene reduserer uttrykket av reportergenet, noe som kan indikere at hNCU-G1 kan ha en direkte hemmende effekt på transkripsjonen fra denne promoteren. GST-pulldown ble gjennomført med hERα-LBD og hNCU-G1, og resultatet gir grunnlag for å tro at resultatene fra tidligere pulldown-forsøk har vært villedende.