Abstract
Sammendrag
Taurin er den vanligste organiske osmolytten i de fleste dyrearter som er engasjert i volumregulering av celler. Tidligere studier har vist at både cellesvelling og TSH-stimulering øker taurineffluksen fra FRTL-5-celler. Begge stimuleringsformene aktiverer to intracellulære signalsystemer, henholdsvis via fosfolipase C (PLC) og adenylyl syklase (AC) . FRTL-5-celler som er dyrket på filtre, danner et epitel og frisetter taurin både fra den apikale og den basolaterale siden. Med disse forholdene som grunnlag, var det ønskelig å undersøke hvilke av epitelsidene hvert av disse signalsystemene aktiverer taurineffluksen fra. Det var også aktuelt å få undersøkt om aktivering, eventuelt modulering av taurineffluks kunne skje via stimulering av purinerge reseptorer, P2Y og A1 adenosin reseptor, som FRTL-5-cellene besitter. Disse reseptorene har vist seg å aktivere signalsystemet som medieres via PLC og ikke via AC.
Cellene ble dyrket henholdsvis i skåler og på Falcon-filtre, og akkumulerte [3H]-taurin dagen før forsøket. Skålene ble utstyrt med et lokk, og filtrene ble montert i en beholder slik at [3H]-taurin fra henholdsvis den apikale og den basolaterale siden kunne frisettes til hvert sitt kammer. Cellene ble utsatt for forskjellig typer stimuli og [3H]-taurin ble samlet opp i ettminuttsintervaller.
Resultatene mine viste at adenosinanalogen PIA, sammen med TSH, aktiverte adenosin A1-reseptorer. PIA og TSH hadde en hemmende effekt på AC og stimulerte PLC, som resulterte i en forsterkning av TSH-stimulert taurineffluksaktivitet. Toxinet PTX hemmet den stimulerende effekten via PLC og opphevet den hemmende effekten på AC, og førte til forsterket aktivering. PIA-stimulering av adenosin A1-reseptor forsterket signifikant svellingsaktivert taurineffluks også. Denne effekten ble fullstendig blokkert av PTX, og indikerer at PIA-stimuleringen ble formidlet via PLC.
ATP stimulerte taurineffluksaktiviteten via P2Y-purinerge reseptorer og PLC. Noe av den ATP-induserte effluksaktiveringen ble uventet hemmet av PTX. Dette kunne indikere at noe av ATP var metabolisert til adenosin som ga en PTX-inhibitorisk effekt, men andre forklaringer på denne effekten er også mulig. Svellingen ser ut for å effektivisere signalsystemet som starter via PLC og leder til taurineffluks. Stimulering med ATP via P2Y purinerge reseptorer, aktiverte taurineffluksen bare fra den apikale siden av celleepitelet.